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            PCR實驗室樣本的制備管理與質控

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            PCR實驗室樣本的制備管理與質控

            2019/06/05 08:46
            浏覽量
            【摘要】:

            樣本制備即核酸的提取純化,其質量的好壞對PCR的影響很大。操作過程中盡量避免頻繁的走動,所有與樣本接觸的器具如吸頭、離心管,加樣器等使用前須經過相應的消毒處理。
             
            樣本制備即核酸的提取純化,其質量的好壞對PCR的影響很大。操作過程中盡量避免頻繁的走動,所有與樣本接觸的器具如吸頭、離心管,加樣器等使用前須經過相應的消毒處理。
             
            實驗人員操作時手法及程序應規範正确,如Taq酶、dNTP、引物等試劑在開蓋使用前應1000r/min離心10s,使黏附在管壁和管蓋内的液體沉于管底、以保證試劑濃度的準确性。
             
            吸取不同試劑時須更換加樣吸頭、以防交叉污染。操作不能劇烈,避免加樣過程中可能會發生氣溶膠所緻的污染以及高分子量基因組DNA的提取質量受到影響。建議使用有國家正式批準文号的配套試劑盒及經國家有關部門注冊登記過的儀器,如高速離心機、水浴鍋和電子天平等。
             
            對因檢測需要而自行選用的試劑進行預實驗,證明其不影響檢測結果的準确性和可靠性後再用于樣本的提取。對不同類型樣本的制備及核酸擴增檢測制定相應的标準操作程序,具體内容有:檢測項目、檢測目的、檢測原理、樣本類型、樣本量、提純方法、提純程序步驟,試劑儀器包括生産商、供應商、有效期、貯存條件、性能參數。提純後的核酸模闆在樣本制備區的生物安全櫃内加入PCR反應混合液。
             
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